style="width:3.03999in;height:3.81326in" />
style="width:3.23997in;height:3.8467in" />
style="width:4.80669in;height:3.20672in" />GB/T 33124—2016 本文是学习GB-T 33124-2016 杨树叶锈病菌检疫鉴定方法. 而整理的学习笔记,分享出来希望更多人受益,如果存在侵权请及时联系我们
本标准规定了杨树叶锈病菌 Melampsora medusae
Thümen,1878的形态学鉴定方法。
本标准适用于白杨 Populus balsamifera L.、黑棉杨 Populus balsamifera
subsp.trichocarpa (Torr.&.Gray)Brayshaw、 美洲黑杨 Populus deltoids Mars
以及落叶松属 Larix spp.、松属 Pinus
spp.、美国花旗松 Pseudotsuga
menxiesii(Mirb.)上的杨树叶锈病菌的检疫和鉴定。
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 2758 美国圆柏苹果锈病菌检疫鉴定方法
SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样
SN/T 2758界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
3.1
冬孢子 teliospore
由双核菌丝的顶端细胞发育成的有性休眠孢子，该类孢子产生担子。
3.2
冬孢子堆 telia
由冬孢子聚集而成。
注：冬孢子堆多数分布在叶背，有些穿过叶表面。
3.3
夏孢子 urediniospore
由锈孢子产生的双核菌丝体上产生的重复性营养阶段孢子。
注：夏孢子开始是在寄主体内生活，然后穿破表皮向外扩散。进入细胞后，以单细胞的形态，生出密集的刺状或泡
状的小棘；上有数个发芽孔，以芽管发芽，同样产生形成夏孢子的菌丝或冬孢子的菌丝。
3.4
夏孢子堆 uredinia
由锈孢子萌发形成的双核菌丝体上产生的第三种孢子堆。
注：栅锈菌属真菌的夏孢子堆没有包被，但有周生侧丝。
中文名：杨树叶锈病菌
英文名：Poplar rust
学名：Melampsora medusae Thumen,1878
GB/T 33124—2016
异名：Uredo medusae(Thümen)Arthur,(1906)
无性型：Caeoma faulliana Hunter (锈孢子器状态)
分类地位：真菌界 Fungi、担子菌门Basidiomycota、冬孢菌纲
Teliomycetes、锈菌目 Uredinales、栅
锈菌科 Melampsoraceae、 栅锈菌属 Melampsora。
传播途径：带菌杨树、转主寄主松属和落叶松属植物及美国花旗松 Pseudotsuga
menxiesii(Mirb.)
是远距离传播主要途径；锈孢子和夏孢子等可随风较长距离地扩散传播。
杨树叶锈病菌的生物学特性和地理分布等其他信息参见附录 A。
主要以夏孢子的形态特征为鉴定依据，性孢子器、锈孢子器、冬孢子和担子等的形态特征为辅助鉴
定依据。
生物显微镜(物镜最大放大倍数100倍，备测量软件或镜台测微尺)、体视显微镜(倍数不低于
50倍)、超净工作台、滴管、医用解剖刀、解剖针、高压灭菌锅、载玻片、盖玻片、三角瓶(250
mL)。
按照 SN/T 2758 执行。
7.1.1.1 杨树上的症状检查
主要检查杨树叶片是否有淡黄斑，特别是叶片背面，从植株的下层叶片开始，逐步向上层叶片逐一
检查，其为害症状参见 A.3。
7.1.1.2 针叶树上的症状检查
主要检查松针上是否有褪色、腐烂，特别是检查掉落的针叶上是否有褪色和腐烂等症状，其为害症
状参见 A.3。
如发现病菌为害症状，取为害样品送实验室检测。如果症状不明显或未发现症状，随机取样，方法
按照 SN/T 2122 执行。
7.2.1.1
如果在寄主上的症状不明显时，将取得的有疑似症状的植株放置于有隔离条件的温室中，直到
GB/T 33124—2016
产生夏孢子止(参见 A.4)。
7.2.1.2
如果是转主寄主，需要将感病松针放置于美洲黑杨或杨树叶锈病菌其他寄主树苗周围，杨树叶
锈病菌的寄主树苗需要种植于有隔离条件并具备人工吹风的温室中，待锈孢子侵染寄主，产生夏孢子止
(参见 A.4)。
7.2.2.1 切片法
采用徒手切片法将杨树叶片或针叶切成薄片(1.0μm～1.5μm),
放在载玻片的水滴中，加一滴乳酚
油作浮载剂，加盖玻片，备镜检。
7.2.2.2 针刺法
用针直接刮取孢子堆上的孢子粉置于离心管中，加入适量的席尔氏浮载剂制成孢子悬浮液，用可调
微量加样器吸取适量(以加盖玻片后悬浮液不外溢为宜)悬浮液至载玻片上，加盖玻片，制成玻片，备
镜检。
性孢子器主要是附着在叶面上，包被于角质层下，散生，淡黄色，长40μm～55μm。
锈孢子器着生在叶背，裸生，淡黄色，大量孢子器堆生，直径0.5 mm;
锈孢子链珠状，近球形，直径
17μm～22μm, 孢子壁无色，厚2.5μm～3μm, 表面略粗糙。
夏孢子堆着生于叶表皮下，大多数突出于叶背面，少量突出叶表，金黄色至橙色，直径150μm~
250μm,
在一些寄主上主要分布在上层叶表，表现为淡色小斑；夏孢子卵圆形至圆形，有时近梨形，端部
圆形，基部平截，内容物金黄色，壁无色；长(23μm～37μm)×(13μm～21μm),
端部厚1μm~ 1.5μm,基部厚2 μm, 两侧厚3μm～5.5μm; 壁上被棘，长8μm～12μm,
超过腰部的一半的区域光滑， 极少数几乎整个腰部全部光滑；小棘长1μm～1.5μm,
宽0.5μm～0.7μm, 棘间距1.5μm～3μm, 临近
光滑区域，小棘变小。发芽孔几乎不可见，孢子上有2～4处可萌芽。夏孢子萌发的菌丝，从夏孢子堆上
四散开来，呈头状丝序，柄长70 μm, 宽 4 μm～6μm,
顶端近圆形，直径14μm～17μm, 或倒卵圆形，少
数棍棒形，(18μm～22μm)×(12μm～16μm), 壁厚度均匀，1.5μm～3μm,
少数在端部可厚达4 μm。
杨树叶锈病菌夏孢子的形态特征见附录 B。
在老叶上，冬孢子堆与夏孢子堆混合，在落叶上大量发生，主要分布在叶背面，在严重感病时，也分
布在叶面，开始时呈淡琥珀棕色，变黑后，呈深红棕色，干枯时呈近黑色，冬孢子堆微突出，在表皮层下，
近圆形至规则形，3个～4个或更多的孢子堆聚集成1个较大的孢子堆，单个冬孢子堆直径90μm~
350μm。
有些冬孢子堆穿过叶面，在叶两面上产生冬孢子。冬孢子是单细胞，近圆柱形，横切面呈圆形
至不规则形，直径30μm～40μm, 壁厚11μm～14μm, 有时在端部壁厚2μm～2.5μm,
包被于寄主表
皮层下。
GB/T 33124—2016
担子在越冬冬孢子堆的表面，产生于冬孢子端部的小孔，呈一层金色，着生于短柄上，短柄宽2μm
~2.5μm,长 2 μm～3μm;
担子圆柱形，端圆；由4个细胞组成，直或微曲，(40μm～65μm)×(7μm~
8μm); 内容物淡金黄色，壁无色。担子细胞具柄，基部宽2μm～2.5μm,
长10μm～12μm, 向端部渐 窄。担孢子球形，直径7.5μm～11μm,
孢子上有1小突起与小梗联接，内容物淡金黄色，壁无色；通常，
从长10μm～12μm 的小梗上长出次生的小梗上的担孢子较小。
杨树叶锈病菌的近似种是阿尔伯塔杨树叶锈病菌 Melampsora albertensis
Arthur,1906 和青杨叶
锈病菌 Melampsora larici-populina Kleb,1902。 其区别参见附录C。
如果检出样品上的病菌形态与7.3的描述相符，则判定为杨树叶锈病菌。
样品经登记和经手人签字后妥善保存。对检出杨树叶锈病菌的样品应保存于5℃~8℃冰箱中，
保存期1个月，以备复核。另外，可制作干标本(参见 D.1),
长期保存。该类样品保存期满后须经高压
灭菌后方可处理。
采用超低温保存法(参见 D.2) 进行菌株保存。
完整的实验记录包括：样品的来源、种类、时间，实验的时间、地点、方法、结果、症状和病菌显微照片
等，并有实验人员和审核人员签字。
GB/T 33124—2016
(资料性附录)
杨树叶锈病菌的其他信息
A.1 地理分布
欧洲：比利时、法国、葡萄牙、西班牙。
亚洲：日本。
非洲：南非、津巴布韦。
北美洲：加拿大、墨西哥、美国。
南美洲：阿根廷、玻利维亚、巴西、智利、乌拉圭。
大洋洲：澳大利亚、新西兰。
A.2 寄主范围
主要寄主：白杨 Populus balsamifera L.、黑棉杨 Populus balsamifera
subsp.trichocarpa(Torr.&.
Gray)Brayshaw、 美洲黑杨 Populus deltoids Mars。
转主寄主：落叶松属Larix spp.、松属 Pinus spp.、美国花旗松 Pseudotsuga
menxiesii(Mirb.)。
A.3 为害症状
杨树叶锈病菌在不同寄主植物上的症状表现有所不同(参见图
A.1),具体如下所示：
a) 在杨树上：
初期侵染表现为淡黄斑，夏孢子堆通常在侵染寄主2周～3周后分布于叶背面(严重时，叶表
面也有分布)。首先侵染下层叶片，之后扩散到整株树。叶片干枯，并提前脱落。3周内，整株
树木的叶片可全部脱落。杨树上的其他栅锈菌也可能导致同样的为害症状。
b) 在针叶上：
当年的松针褪色、腐烂，并被有夏孢子堆和锈孢子器。这些孢子器只在针叶上分布，极少分布
在新芽上。受侵染的叶片最终枯死并脱落。
style="width:3.03999in;height:3.81326in" />style="width:3.23997in;height:3.8467in" />style="width:4.80669in;height:3.20672in" />GB/T 33124—2016
style="width:3.96669in;height:3.76684in" />
style="width:5.04002in;height:3.15348in" />
style="width:10.47337in;height:6.62662in" />
说明：
注： 1和4引用自 Anderson,2010;2 和 9 引 用 自 Shain
等，1989;3和6引用自 Cranshaw,2008;5 引用自 Ridley
&.Dick,2010;7 引用自 nature.barkeley.edu,2012;8引用自
Schippers,2012;10 引用自 Hunt,1978。
图 A.1 杨 树 叶 锈 病 菌
Melampsora medusae Thümen 为 害 症 状
style="width:3.77993in;height:3.08in" />GB/T 33124—2016
A.4 生物学和生态学特性
杨树叶锈病菌属于转主寄生的担子菌，但是在自然条件下，夏孢子不需要转主寄主，可在寄主杨树
的叶芽和树皮下越冬。春季，杨树上的冬孢子堆产生担孢子侵染针叶，在叶片上形成性孢子器和锈孢子
器。锈孢子可随风长距离扩散，在夏季侵染易感病杨树。锈孢子不再侵染针叶寄主。在杨树上形成的
夏孢子也能随风长距离扩散。在北半球的湿热地区和南半球，夏孢子是主要的侵染源。夏孢子发育成
芽管穿越杨树的叶片，芽管在叶面上扩张，并通过气孔侵入叶内，附着胞有或无。亚气孔囊泡形成后，膨
大并包围数个细胞，成为吸器的原母细胞，形成吸器后，即建立寄生关系。湿润、温热的气候条件有利于
该病害的暴发。
杨树叶具有明显的小种分化，不同的小种其侵染力也不同。杨树叶锈病菌的侵染力主要受到温度
的影响，另外，分布在不同地域中的小种，其侵染力也不同，分布在北纬的杨树叶锈病菌比分布在南纬的
小种侵染力更强。同样也有因不同寄主的小种分化。
在美洲黑杨树叶上，冬孢子堆经冬破除休眠后发育成担孢子，担孢子侵染落叶松属和其他松属、花
旗松属针叶树。在受侵染的松针上形成性孢子器和锈孢子器，锈孢子器释放锈孢子侵染易感病美洲黑
杨叶片。在杨树叶锈病流行的美国东南部，夏孢子堆最早于6月出现。冬孢子堆于晚夏和秋季形成。
夏孢子侵染美洲黑杨需要叶片保持8 h
的湿润。夏孢子萌发的最适温度是15℃~21℃。
杨树叶锈病菌的生活史见图 A.2。
冬孢子在杨树受感染
的落叶或枯叶的背面越冬
锈孢子侵染杨属树种的叶片，
在叶背产生夏孢子堆
style="width:6.91338in;height:3.46016in" />
style="width:2.9467in;height:2.2591in" />
春季，冬孢子萌发产生以风为媒的
担孢子，侵染针叶
在松针背面产生性孢子器
style="width:2.38014in;height:1.57344in" />
在下层松针表而由授粉的
性孢子器产生锈孢子器
图 A.2 杨树叶锈病菌 Melampsora medusae Thümen的生活史
style="width:5.77335in;height:4.56676in" />GB/T 33124—2016
(规范性附录)
杨树叶锈病菌夏孢子的形态特征
杨树叶锈病菌夏孢子的形态特征图见图B.1、图 B.2。
style="width:6in;height:4.58681in" />
注：A.引用自 Newcombe &.Chastagner,1993;B.引用自 Spiers,1985。
图 B.1 杨树叶锈病菌 Melampsora medusae Thimen
夏孢子电镜扫描图
style="width:9.29337in;height:5.76004in" />
注：引用自Newcombe &.Chastagner,1993。
图 B.2 杨树叶锈病菌 Melampsora medusae Thümen
夏孢子光学显微照片
GB/T 33124—2016
(资料性附录)
杨树叶锈病菌与近似种的区别
杨树叶锈病菌(Melampsora medusae
Thümen,1878)的近似种类是阿尔伯塔杨树叶锈病菌(Mel- ampsora albertensis
Arthur,1906)。
前者与后者在形态和寄主范围上都有明显的区别；在澳大利亚，杨
树叶锈病菌的近似种类是青杨叶锈病菌(Melampsora larici-populina
Kleb,1902),该两种锈菌具有相
同寄主和转主寄主，但是，夏孢子形态不同。三种杨树叶锈病菌的区别见表C.1
和图C.2。
表 C.1 杨树叶锈病菌与亚伯达杨树锈菌的区别
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GB/T 33124—2016
(资料性附录)
杨树叶锈病菌干标本的制作和孢子保存方法
D.1 杨树叶锈病菌干标本的制作和保存方法
将感染杨树叶锈病菌的寄主叶，分层压在标本夹中，在两层标本纸(每层厚3张～4张)中放一层标
本(不重叠)。每个标本夹的总厚度以不超过4 cm
为宜，并根据温湿度情况，以保证标本不变色发霉为
前提，及时更换标本纸。可自然干燥，也可采用烘箱快速干燥；烘箱快速干燥时烘箱温度以控制在
(45±3)℃为宜，采用快速烘干法，换标本纸间隔时间应不超过2 h。
直到标本含水量在20%～30%
为宜。
干标本可置于垫有絮棉和樟脑粉的标本盒中进行保存，或直接保存在液氮中。
D.2 杨树叶锈病菌孢子的保存方法
采用超低温保存方法：将经(40±2)℃烘干处理含水量为20%～30%的夏孢子粉用液氮封存于离
心管中，或直接密封在离心管中于一50 ℃下长期保存。
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